(499) 957-83-07
ГлавнаяСпециалистуПрименение системы для разжижения мокроты COPAN SL Solution при ...

Применение системы для разжижения мокроты COPAN SL Solution при взятии образцов у пациентов с муковисцидозом и без него

27.10.2012
Университет системы здравоохранения Мичигана, Энн Арбор, Мичиган
 
Краткое содержание
Освещение проблемы:
     COPAN SL Solution (SL) – новая система, предназначенная для гомогенизации и разжижения мокроты для ее дальнейшего посева вручную или с помощью станции автоматизированного посева Walk Away Specimen Processor (WASP) (COPAN, Мурриета, Калифорния). С помощью специального устройства (диппера) образец мокроты переносят в пробирку SL (содержащую дитиотреитол), интенсивно перемешивают и подвергают разжижению перед посевом на чашки. Мы сравнили стандартную процедуру обработки образцов мокроты с помощью системы SL у пациентов с муковисцидозом (CF – cystic fibrosis) и без него (non-CF).
Методы:
     Проанализировано 104 образца мокроты (CF – 52 и non-CF – 52). Посев мокроты проводился по стандартной методике, а остатки образцов были перенесены в систему SL Solution с помощью диппера. Пробирку SL энергично встряхивали в течение 15 секунд и затем оставляли на столе на 15 минут. После этого проводили посев петлёй для инокуляции объёмом 10 мкл на ту же среду, что и в стандартной методике. В исследовании использовались стандартные методы инкубации и идентификации. Был проведён сравнительный анализ микроорганизмов, изолированных по обеим методикам.
Результаты:
     CF-мокрота: при использовании стандартной методики было получено 140 изолятов, при использовании системы SL 158 изолятов. Пятнадцать из девятнадцати дополнительных изолятов оказались Pseudomonas aeruginosa. Один дополнительный изолят, полученный при использовании стандартной методики, был идентифицирован как S. aureus.
 
Мокрота пациентов с муковисцидозом (n=51)
 
Метод
S. aureus
P. aeruginosa
A. xylosoxidans
S. maltophilia
B. cepacia
H. influenzae
Плесневые грибы
Общее количество изолятов
Стандартный
29
79
7
8
9
1
7
140
COPAN
28
94
7
8
10
2
9
158
 
non-CF мокрота: В десяти культурах содержалась лишь нормальная микрофлора дыхательных путей, в 4 роста не было, и в 38 культурах обнаружены патогены, способные вызывать инфекции дыхательных путей. При использовании стандартной методики было получено 50 изолятов, при использовании системы SL – 58 изолятов.
 
Мокрота пациентов без муковисцидоза (n=52)
 
Метод
S. aureus
Enterobacteriaceae
P. aeruginosa
Не ферментирующие бактерии
Другие
Общее количество изолятов
Стандартный
10
16
14
6
4
50
COPAN
12
17
17
5
4
55
 
Выводы:
     Система SL solution с диппером для мокроты эффективно разжижает мокроту для дальнейшего посева вручную или с помощью автоматизированной системы. Результаты использования системы SL превосходят результаты, полученные при стандартной методике обработки образцов мокроты, собранных у пациентов с муковисцидозом и без него. В образцах мокроты пациентов с муковисцидозом наблюдалось улучшенное поддержание жизнеспособности всех микроорганизмов и значительное увеличение количества изолятов P. aeruginosa.
Введение

     COPAN SL Solution – готовая к использованию система для разжижения образцов мокроты с помощью муколитического агента (основной действующий компонент – дитиотрейтол). Система SL Solution быстро разжижает образцы мокроты, не оказывая влияния на морфологию, рост или микроскопическое окрашивание содержащихся в ней патогенов. Она обеспечивает эмульсификацию мокроты и слизи, в результате чего образуется гомогенная суспензия, позволяющая выполнять посевы образцов более просто, единообразно и воспроизводимо.
 
Методы
 
Стандартная методика
С использованием системы SL
Образец
Мокрота
Мокрота
Обработка
 
Используйте диппер для мокроты COPAN, чтобы перенести образец мокроты в систему SL Solution.
Энергично встряхивайте в течение 15 секунд.
Оставьте на столе на 15 минут.
Среда
Non-CF
Кровяной агар SBAP
Агар МакКонки
Шоколадный агар
CF
Кровяной агар SBAP
Агар МакКонки
Шоколадный агар с бацитрацином
Солевой агар с маннитолом
Агар BCSA
Non-CF
Кровяной агар SBAP
Агар МакКонки
Шоколадный агар
CF
Кровяной агар SBAP
Агар МакКонки
Шоколадный агар с бацитрацином
Солевой агар с маннитолом
Агар BCSA
Способ посева
Тампон
Петля объёмом 10 мкл
Инкубация
CO2: Кровяной агар SBAP, агар МакКонки, шоколадный агар
Воздух: Солевой агар с маннитолом, агар BCSA
CO2: Кровяной агар SBAP, агар МакКонки, шоколадный агар
Воздух: Солевой агар с маннитолом, агар BCSA
Анализ
24/48 ч:   все
72 ч:        агар BCSA
24/48 ч:   все
72 ч:        агар BCSA
Интерпретация результатов
Стандартная идентификация
Сравнение морфологии
Стандартная идентификация дополнительных микроорганизмов

 

Результаты

CF-мокрота (n=51)

 
Стандартная методика
С использованием системы SL
Staphylococcus aureus
29
28
Pseudomonas aeruginosa
79
94
Achromobacter xylosoxidans
7
7
Stenotrophomonas maltophilia
8
8
Burkholderia cepacia
9
10
Haemophilus influenzae
1
2
Плесневые грибы
7
9
ВСЕГО изолятов
140
158

Non-CF-мокрота (n=52)

 
Стандартная методика
С использованием системы SL
Staphylococcus aureus
10
12
Enterobacteriaceae 1
16
17
Pseudomonas aeruginosa
14
18
Неферментирующие бактерии 2
6
5
Streptococcus pneumoniae
1
1
Moraxella catarrhalis
2
2
Haemophilus influenzae
1
1
ВСЕГО изолятов
50
56

1. E. coli (2), Klebsiella(3), Enterobacter (6), Serratia (4), Morganella (1), Proteus (1), Providencia (1)
2. Acinetobacter (1), Stenotrophomonas (3), Achromobacter (1)

• Система SL Solution разжижает мокроту для получения гомогенизированного образца и его дальнейшего посева на чашки Петри;
• Использование системы SL позволяет выявить большее количество микроорганизмов, чем стандартная методика;
• Система SL лучше поддерживает жизнеспособность Pseudomonas aeruginosa, особенно в образцах мокроты пациентов с муковисцидозом.

Авторы благодарны компании COPAN, предоставившей систему разжижения образцов мокроты SL Solution

 

COPANSocorexLP ITALIANA SPAMASTScharlauGLW Storing Systems GmbH