Усиленная среда для клостридий

Усиленная среда для клостридий

Reinforced Clostridial Medium (Eur.Pharm.)

Также известно, как RCM, Reinforced Medium for Clostridia

Назначение

Жидкая среда для культивирования и подсчета клостридий методом MPN, согласно Методике Европейской Фармакопее.

Описание

Улучшенный агар для клостридий первоначально был разработан Hirsch и Grinstead для стимуляции роста инокулятов, содержащих малое число микроорганизмов, и получения большего количества колоний. Позднее Barnes и Ingram использовали эту среду для выращивания вегетативных форм при выявлении Clostridium perfringens. Barnes также использовала ее для количественного определения клостридий в пищевых продуктах; другие авторы применяли ее для подсчета C. thermoscharolyticum в сахаре, при исследованиях кишечной микрофлоры, для подсчета колоний в экскрементах человека и животных и т. п.

Для подсчета микроорганизмов методом наиболее вероятных чисел (НВЧ) предпочтительной является жидкая среда.

Munoa и Parés добавили к данной среде стерилизованный фильтрованием раствор, содержащий налидиксовую кислоту (0,02 г/л), полимиксин (0,025 г/л), канамицина сульфат (0,05 г/л), натрия йодацетат (0,025 г/л) и трифенил-тетразолия хлорид (0,025 г/л), чтобы получить селективную и дифференциальную среду для определения бифидобактерий в воде и в сточных водах. Tartera et al. использовали ее с добавлением антибиотиков для выделения и подсчета бактериофагов, заражающих Bacteroides spp. (бульон BPRM). Позднее данная среда была включена в стандарт ISO 10705-4:2001.

Приготовление

Растворить 38 г порошка в 1 л дистиллированной воды и довести до кипения при постоянном помешивании. Разлить в соответствующие флаконы или пробирки и стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС.

Техника посева

Исследуемый материал измельчается с помощью мельницы или гомогенизатора и используется для приготовления десятичных разведений. Из каждого разведения берут аликвоту и рассевают ее на чашки Петри или в пробирки; затем заливают сверху расплавленной и охлажденной до 50°С средой.

Дают среде застыть и инкубируют при 30-55°С (в зависимости от предполагаемого микроорганизма) в течение 1-10 сут. Обеспечить анаэробные условия в пробирке можно, покрыв поверхность агара вазелиновым маслом сразу же после его застывания. Если используются чашки Петри, их необходимо инкубировать в атмосфере, не содержащей кислорода.

Хранение

Среда предназначена только для лабораторного использования. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%).

Контроль качества

Температура инкубации:  35°C ± 2,0

Время инкубации: 24 часа

Инокуляция: 10-100 КОЕ (Продуктивность)) // Анаэробные условия

* D(Продукция газа сомнительная/незначительная)

Информация для заказа: