Палкам агар

Палкам агар

Palcam Agar Base

Назначение

Плотная, селективная и дифференциальная среда для определения подсчета и выделения листерий, согласно стандартам ISO 11290-1 и 11290-2.

Описание

В основе Палкам-агара лежит среда, которую изначально описал Неттен и его коллеги; среда обладает высокой селективностью и способствует хорошей колониальной дифференциации. Селективность достигается путем включения в состав хлорида лития, акрифлавина, полимиксина В и цефтазидима, поскольку они ингибируют рост почти всех грам-отрицательных и грам-положительных бактерий. Listeria гидролизует эскулин до эскулитина, который реагирует с цитратом аммония-железа, в результате чего образуется темный осадок, а колонии имеют серо-зеленый цвет с бежевым ореолом. Если на данной среде вырастают энтерококки или стафилококки, их можно легко распознать, поскольку они утилизируют маннитол и образуют желтые колонии с такими же ореолами, что контрастирует с вишнево-красным цветом среды.

Однако, если на среде находится много колоний Listeria, среда темнеет, что может вызвать интерференцию в дифференциации. В таких случаях рекомендуется инокулировать среду более разбавленным образцом.

Приготовление

Развести 72 г порошка в 1 л дистиллированной воды и дать впитаться. Вскипятить и разлить по 500 мл во флаконы. Стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС. Остудить до 50°C и асептически добавить в каждый Селективную добавку Listeria (Palcam Agar Selective Supplement) (Артикул 06-110CASE или 06-110-LYO). Хорошо перемешать и разлить по чашкам Петри.

Обратите внимание: Приготовленная среда (Агар+добавка) должна храниться в темном месте во избежание инициации процесса окисления акрифлавина, что в свою очередь может подавлять рост листерий. 

Техника посева

На Палкам-агар вносят посевной материал, отобранный из первичной среды обогащения (UVMI, Артикул 02-472 или Lovett, Артикул 02-498) или вторичной среды обогащения (UVMII, Артикул 02-472 или Fraser, Артикул 02-496). Инкубируют в микроаэрофильной атмосфере в течение 48 часов при 37°С. В данных условиях колонии Listeria имеют диаметр приблизительно 2 мм и серо-зеленый цвет с черным центром и ореолом. Колонии Enterococcus и Staphylococcus больше по размеру, серые с зелено-коричневым ореолом, если они не ферментируют маннитол, и желтые с желтым ореолом, если ферментируют. Предполагаемые колонии Listeria нуждаются в биохимическом и серологическом подтверждении.

Необходимые добавки

Селективная добавка Listeria (Palcam Agar Selective Supplement) (Артикул 06-110CASE/ 06-110-LYO)

Флакон содержит:

Необходимое количество на 500 мл среды.

Акрифлавин....................................... .2.50 мг

Полимиксина В сульфат..................... 5.00 мг

Натрия цефтазидим……………….........1.00 мг

Дистиллированная вода (Растворитель)

Хранение

Среда предназначена только для лабораторного использования. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%).

Контроль качества

Температура инкубации:  35°C ± 2,0

Время инкубации: 24-48 часов

Инокуляция: 10-100 КОЕ (Продуктивность)/ 1.000-10.000 КОЕ (Селективность). Метод посева: спиральный (ISO/TS 11133-1/2)

Информация для заказа:

Артикул	Упаковка
01-470-500	500 г
01-470BA05	5х500 мл
064-PA0070	20 чашек Ø90 мм
06-110LYO1	Селективная добавка Palcam для листерий, 10 флаконов