Основа полужидкой среды Раппапорта-Василиадиса

Основа полужидкой среды Раппапорта-Василиадиса

Rappaport Vassiliadis Modified Semi-Solid Medium Base(MSRV)

Также известно, как MSRV

Назначение

Полужидкая среда, используемая для выявления подвижных штампов Сальмонелл. 

Описание

Состав основы модифицированной полужидкой среды Раппапорта-Василиадиса взят у DeSmedt et al. Она обеспечивает более эффективное обогащение по сравнению с традиционными методиками. Быстрая миграция подвижных штаммов Salmonella spp. в полужидкой среде позволяет быстро выявлять их благодаря образованию зоны роста вокруг места инокуляции.

Рост других подвижных микроорганизмов ингибируется новобиоцином, малахитовым зеленым и высокими концентрациями хлорида магния.

Вследствие низкой концентрации агара среда при застывании образует очень мягкий и непрочный гель, который при температуре инкубации (42°С) позволяет подвижным штаммам Salmonella spp. легко и быстро передвигаться.

Приготовление

Развести 31,6 г порошка в 1 л дистиллированной воды. Нагрейте раствор на водяной бане до полного растворения.

Остудите до 50°C и добавьте 20 мг/л Селективной добавки с новобиоцином (06-147-LYO). Не автоклавируйте и повторно не нагревайте. Хорошо перемешайте и разлейте по чашкам. Поместите чашки в холодильник на 1 час для застывания геля. Перемещайте чашки осторожно, так как среда полужидкая и может разлиться. Чашки с этой средой рекомендуется хранить в темном месте, при температуре 2-8°C.

Техника посева

1.Три капли (ок. 0,1 мл) предварительно обогащенной культуры наносят на разные участки подсушенной чашки с агаром при комнатной температуре.

2.Не переворачивая, инкубируют чашки в аэробных условиях при температуре 42°C не дольше 24 ч.

3.Образование мутного или непрозрачного кольца вокруг места нанесения культуры указывает на наличие подвижных сальмонелл.

4.Чтобы убедиться в чистоте изолята и для проведения подтверждающих тестов берут образцы с внешней границы зоны роста.

5.Чтобы предотвратить получение ложноотрицательных результатов, вызванных отсутствием подвижных штаммов Salmonella  spp. в образцах, рекомендуется параллельно провести стандартное обогащение в жидкой среде.

Необходимые добавки

Селективная добавка новобиоцин (Артикул 06-147-LYO)

Флакон содержит:

Необходимое количество на 500 мл среды:

Новобиоцин, натриевая соль......... 20,00 мг

Дистиллированная вода (Растворитель)

Хранение

Среда предназначена только для лабораторного использования. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%)

Контроль качества

Температура инкубации:  42°C ± 0,5

Время инкубации: 24-48 часов

Инокуляция: Предварительное обогащение в течении 4-х часов с последующим высевом 3 капель на поверхность чашки Петри со средой.