Основа агара Oxford

Основа агара Oxford

Oxford Agar Base

Назначение

Плотная, селективная и дифференциальная среда для определения подсчета и выделения листерий, согласно стандартам ISO 11290-1 и 11290-2.

Описание

Оксфордский агар является производным среды, использованной Кертисом и его коллегами; питательные свойства данной среды эквивалентны колумбийскому агару с добавлением ингибиторных веществ, которые способствуют снижению количества нежелательных бактерий.

Текущий состав среды способен поддерживать рост и ингибировать грам-положительные и грам-отрицательные бактерии и дрожжи. В состав селективной добавки включены следующие ингибиторы: циклогексимид, акрифлавин, колистин, фосфомицин и цефотаксим; в совокупности с хлоридом лития происходит ингибирование роста всех бактерий, за исключением Listeria. Колонии Listeria легко распознать, поскольку они гидролизуют эскулин до свободного эскулитина, который реагирует с ионами железа и образует темный осадок вокруг колоний; сами колонии обычно серо-синего цвета с очень темным центром.

Приготовление

Развести 58,5 г порошка в 1 л дистиллированной воды и позволить впитаться. Вскипятить и разлить 500 мл во флаконы. Стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС. Остудить до 50°C и асептически добавить в каждый Селективную добавку Listeria (Palcam Agar Selective Supplement) (Артикул 06-110CASE или 06-110-LYO). Хорошо перемешать и разлить по чашкам Петри.

Обратите внимание: Приготовленная среда (Агар+добавка) должна храниться в темном месте во избежание инициации процесса окисления акрифлавина, что в свою очередь может подавлять рост листерий. 

Техника посева

Хотя селективность среды достаточно высока для изоляции и дифференциации при прямой инокуляции поверхности, рекомендуется использовать предыдущее разведение посевного материала и более концентрированные разведения при работе с сильно загрязненными образцами.

Большинство авторов предпочитают работать с одной или двумя основными культурами в любой первичной среде обогащения (UVMI, Артикул 02-472 или Lovett, Артикул 02-498) или вторичной среде обогащения (UVMII, Артикул 02-472 или Fraser, Артикул 02-496) перед инокуляцией оксфордского агара.

Инкубацию проводят при 37°С и спустя 24 часа можно увидеть типичные колонии Listeriamonocytogenes. Тем не менее, рекомендуется продлить инкубацию на дополнительные 20-24 часа для обнаружения медленно растущих штаммов, даже несмотря на то, что это может способствовать росту стафилококков или стрептококков.

Необходимые добавки

Селективная добавка Listeria (Oxford Agar Selective Supplement) (Артикул 06-127-LYO)

Флакон содержит:

Необходимое количество на 500 мл среды.

Акрифлавин.........................................2.50 мг

Фосфомицин....................................... 5.00 мг

Натрия цефотаксин............................. 1.00 мг

Колистин............................................ 10.00 мг

Циклогексимид.................................... 200.00 мг

Дистиллированная вода (Растворитель)

Хранение

Среда предназначена только для лабораторного использования. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%).

Контроль качества

Температура инкубации:  35°C ± 2,0

Время инкубации: 24-48 часов

Инокуляция: 10-100 КОЕ (Продуктивность)/ 1.000-10.000 КОЕ (Селективность). Метод посева: спиральный (ISO/TS11133-1/2)

Listeria monocytogenes ATCC 19114

Информация для заказа:

Артикул	Упаковка
01-471-500	500 г
01-471BA05	5х500 мл
06-127LYO1	Селективная добавка Oxford, 10 флаконов