Лизиновый железосодержащий агар

Lysine Iron Agar (LIA)

Назначение

Дифференциальная среда для Энтеробактерий, рекомендованная Edwars и Ewing для идентификации сальмонелл и Arizona arizonae (известная как Salmonella choleraesuis subsp. arizonae).

Описание

Лизин-железная среда (LIA) широко применяется для дифференциации разных биотипов сальмонелл, особенно S. arizonae, которые на стандартных селективных средах для выделения, таких как среда МакКонки или дезоксихолатная среда, могут образовывать окрашенные или бесцветные колонии из-за довольно высокой вариабельности ферментации лактозы.

Используя LIA в сочетании с железным агаром Клиглера (Артикул 01-103) или трехсахарным железосодержащим агаром (Артикул 01-192), можно избежать получения ложно-отрицательных результатов идентификации из-за присутствия в пробе лактозоотрицательных сальмонелл.

Сальмонеллы – единственный род энтеробактерий, который декарбоксилирует лизин и образует существенное количество сероводорода.

Среда LIA отлично подходит для проверки этих двух характеристик.

Приготовление

Растворить 34,5 г порошка в 1 л дистиллированной воды и довести до кипения. Разлить в соответствующие флаконы или пробирки и стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС. Дать затвердеть в скошенной позиции, с образованием длинной поверхности скошенного агара и короткого столбика среды.

Техника посева

Презумптивными колониями из первичной среды для выделения инокулируют пробирку со средой Клиглера и, без повторного забора петлей культуры, наносят штрихи на поверхность косяка со средой LIA и затем производят глубокий посев уколом. Инкубируют с неплотно закрытыми пробками при температуре 35-37°C в течение 24 часов.

Микроорганизмы, декарбоксилирующие лизин, вызывают сильное защелачивание всей среды, придавая индикатору фиолетовый цвет. Микроорганизмы, не способные декарбоксилировать лизин, закисляют среду вблизи дна, вызывая желтое окрашивание, тогда как на поверхности среды сохраняется исходное окрашивание или появляется щелочная реакция.

Протеи идентифицируются легко, так как, помимо пожелтения на дне, они дают характерное красное или оранжевое окрашивание на поверхности из-за окислительного дезаминирования лизина. Микроорганизмы, продуцирующие сероводород, вызывают почернение среды из-за образования осадка серного железа.
Хотя возможно образование газа, обычно эта среда не создает оптимальных условий для газообразования и дает очень непостоянные результаты с тотальным подавлением роста в некоторых случаях.

Типичные реакции различных энтеробактерий на среде LIA

Род и вид	Скос	Столбик	Газ	so₂
Escherichia	Щ. (Синий)	Щ. или Н	– или +	–
Shigella	Щ.	К.	–	–
Salmonella spp.	Щ.	Щ. или Н	–	+ (–)
Salmonella typhi	Щ.	Щ.	–	+ или –
Salmonella arizona	Щ.	Щ. или Н	–	+ (–)
Citrobacter	Щ.	К.	– или +	+ или –
Edwarsiella	Щ.	Щ.	– или +
Klebsiella	Щ. или Н	Щ. или Н	+ или –	–
Enterobacter cloacae	Щ.	Щ. или Н	+ или –	–
Enterobacter aerogenes	Щ.	Щ. или Н	+ (–)	–
Hafnia	Щ.	Щ. или Н	– или +	–
Serratia	Щ. или Н	Щ. или Н	–	–
Proteus vulgaris	R	К.	–	– (+)
Proteus mirabilis	R	К.	–	– (+)
Morganella morganii	Щ. или R	К.	–	–

Щ. – щелочная реакция (цвет синий);

Н. – нейтральная реакция (натуральный цвет, без изменений);

К. – кислая реакция (цвет желтый)

Хранение

Среда предназначена только для лабораторного использования. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%)

Контроль качества

Температура инкубации: 35°C ± 2,0

Время инкубации: 16-24 часа

Метод посева: Укол в столбик и штриховой посев на скошенный агар.

Микроорганизм	Рост	Примечание
Enterococcus faecalis ATCC 29212	Хороший	Скос: Желтый; Столбик: Желтый; Газ: –; H₂S: –
Escherichia coli ATCC 25922	Хороший	Скос: Щ. (фиолетовый), Столбик: Щ.; Газ: –, H₂S: –
Proteus mirabilis ATCC 43071	Хороший	Скос: Красный; Столбик: К.; Газ:–, H₂S: +
Salmonella abony NCTC 6017	Хороший	Скос: Alk(violet); Столбик: Щ.; Газ: –; H₂S: +
Salmonella typhimurium ATCC 14028	Хороший	Скос: Alk(violet); Столбик: Щ.; Газ: –; H₂S: +

Информация для заказа:

Артикул	Упаковка
01-094-500	500 г
01-094BA05	5х500 мл
064-TA0117	20 tubes with 7,5ml of slanted agar