ДНКаза агар

ДНКаза агар

DNase Agar

Также известно, как DNase Test Agar; Deoxyribonuclease Test Agar; Deoxyribonucleic Acid Agar; DNA Agar.

Назначение

Плотная питательная среда для определения ДНК-азной активности микроорганизмов, особенно Staphylococcus и Serratia spp.  

Описание

Jeffries, Holtman и Guse (1957) включили ДНК в общую среду с агаром для изучения продукции ДНКазы бактериями и грибами. Микроорганизмы, продуцирующие ДНКазу, расщепляют ДНК до нуклеотидных фрагментов. Эта реакция проявляется образованием прозрачной зоны вокруг роста, остальная часть чашки остается мутной. Соляная кислота вступает в реакцию с ДНА, образуя белый осадок, который делает среду мутной, и не реагирует с нуклеотидами (зоны прозрачности).

Эта среда также полезна для идентификации Serratia marcescens в клинических образцах, так как этот микроорганизм является активным продуцентом ДНКазы. Smith et al. (1969) модифицировали среду, добавив толуидин синий и кристаллический фиолетовый, и сообщили, что грамотрицательные ДНКаза-продуцирующие бациллы, вырастающие на этой среде, могут быть описаны как виды Serratia.

Микроорганизмы, которые продуцируют ДНК-азу, способны редуцировать нуклеотидные фрагменты. Эта реакция учитывается в появлении чистой зоны вокруг выросших колоний (соляная кислота реагирует с ДНК-продуктами  белой зоной преципитации) Некоторые авторы утверждают, что у патогенных стафилококков ДНК-азная активность коррелирует с коагулазной активностью. Одновременно можно учитывать ферментацию маннита, если добавить в 1 литр ДНКазы агара после стерилизации 10 г маннита и 0,025 г фенолового красного. Позитивные результаты проявляются более четко у S.aureus.

Среда также используется для идентификации Serratia marcescence в клинических образцах.

Приготовление

Развести 42 г порошка в 1 л дистиллированной воды и вскипятить при постоянном помешивании. Разлить в соответствующие флаконы или пробирки и стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС. Остудить до 50ºС и разлить в чашки Петри.

Техника посева

Для посева на агаровые чашки с ДНКазой наносят инокулят густым штрихом через всю поверхность агара или отдельными пятнами. Исследуемую культуру засевают на чашку в виде полосок или «кнопок» и инкубируют при 35-37ºС 18-24 часа.

Чтение результатов производят после того, как в чашку с культурой наливают 1NHCL и наблюдают образование зоны просветления вокруг полоски культуры. Если чашка вся меняет оттенок без образования зоны просветления, тест считается негативным.

Хранение

Среда предназначена только для лабораторного использования. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%)

Контроль качества

Температура инкубации:  35°C ± 2,0

Время инкубации: 24 часа

Метод посева: Штриховой

Артикул	Упаковка
01-346-500	500 г
01-346BA05	5х500 мл
064-PA6062	20 чашек Ø90 мм, с с метиловым зеленым