Цитратный агар Кристенсена

Цитратный агар Кристенсена

Christensen's Citrate Agar

Назначение

Дифференциальная плотная среда для подтверждения утилизации цитрата, как единственного источника углерода в присутствии органического азота, согласно стандарту ISO21567:2004.

Описание

Среда описана в 1949 г. Christensen,  предназначена для дифференциации колиформ и энтеропатогенных бактерий по утилизации цитрата и продукции H₂S. В 1955 г. Edwards и Ewing рекомендовали среду для определения использования энтеробактериями цитрата как единственного источника углерода в присутствии органического азота.

В 1965 г. Costin исключил из рецептуры тиосульфат и цитрат аммония железа, так как по продукции H₂S эта среда не соответствовала другим культуральным средам.

Единственным источником углерода является цитрат натрия, так как декстроза присутствует в слишком низкой концентрации. Цистеин и дрожжевой экстракт являются факторами роста. Хлорид натрия и фосфат калия поддерживают осмотическое давление и pH. Цитрат аммония железа и тиосульфат – субстраты для образования H₂S, а феноловый красный – индикатор pH, цвет которого изменяется со светло-желтого на красный при защелачивании среды. 

Приготовление

Развести 25,3 гпорошка в 1 л дистиллированной воды и вскипятить. Разлить в соответствующие по объему флаконы или пробиркии стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС. Дайте среде застыть с образованием скошенной поверхности среды, длинной 4-5 см и столбика 2-3 см.

Техника посева

Если тестируется только утилизация цитрата согласно стандарту ISO 21567:2004, поверхность косяка можно инокулировать очень небольшой  дозой чистой культуры. Количество питательной среды, перенесенной с инокулятом, должно быть минимальным.

Если образец тестируется на продукцию H₂S,  производят посев уколом.

Пробирки инкубируют в аэробных условиях при температуре 37 ± 1°C в течение 24-48 часов.

Рост можно обнаружить по красному окрашиванию среды вследствие продукции щелочных субстанций. Продукция H₂S выявляется по почернению среды в зоне роста по линии укола.

При отсутствии роста в течение первых двух дней, пробирки инкубируют еще 2 дня и повторно инспектируют. Шигеллы на этой среде не вырастают.

Ограничения процедуры

-Избыточный инокулят может дать ложноположительный результат.

-Если при инокуляции в пробирку заносится питательная среда, могут быть получены сомнительные результаты. Некоторые авторы рекомендуют разводить или промывать инокулят солевым раствором, чтобы цитрат по возможности оставался единственным источником углерода.

-Некоторые цитрат-положительные микроорганизмы растут медленно, и для изменения окраски фенолового красного может потребоваться более длительная инкубация (4 дня или более).

В некоторых случаях могут быть получены неоднозначные результаты (напр., Providencia), тогда рекомендуется сделать посев во вторую пробирку и инкубировать при комнатной температуре в течение недели.

Хранение

Предназначены только для лабораторного Среда предназначена только для использования в лабораториях. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%).

Контроль качества

Температура инкубации: 35°C ± 2,0

Время инкубации: 24 - 48 часов

Инокуляция: посев штрихом

Информация для заказа:

Артикул	Упаковка
01-664-500	500 г
01-664BA05	5х500 мл