Бульон Жиолитти-Кантони

Бульон Жиолитти-Кантони 

Giolitti-Cantoni Broth

Назначение

Жидкая среда для селективного определения стафилококков в пищевых продуктах, согласно стандартамISO, FIL-IDFи EN.

Описание

Эта среда для селективного обогащения стафилококков была разработана в 1966 г. Giolitti и Cantoni.

Добавление Полисорбата 80 необходимо для успешного выделения Staphylococcus aureus (Chopin et al., 1985). Сопутствующая микрофлора подавляется хлоридом лития и теллуритом калия.

Анаэробные условия повышают селективность среды. Росту стафилококков на этой среде способствует пируват, глицин, высокие концентрации маннита. Рост грамнегативных штаммов в этой среде подавляется высокими концентрациями теллурита калия. Рост микрококков подавляется анаэробными условиями. Стафилококки растут на этой среде вследствие редукции теллурита калия в металлический теллурит в виде черных колоний.

Приготовленная среда может храниться до применения в течение 1-2 недель в условиях холодильника. Перед использованием среду дегазируют на водяной бане в течение 15 минут при температуре 100ºС, быстро охлаждают и добавляют стерильный теллурит калия.

Приготовление

Развести 55,2 г порошка в 1 л дистиллированной воды. Среду можно приготовить как в исходной концентрации, так и в двойной, увеличив соответственно количество сухого порошка. Разлить в соответствующие пробирки объемом 20 мл, каждая. Стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС. Остудить и добавить 0,1 мл 1% Стерильного Раствора Калия Теллурита (06-089) в каждую пробиркуи 0,2 мл/на пробирку, если используется двойная консистенция среды.

Техника посева

Осуществляется согласно стандартным протоколам для конкретных продуктов (EN-ISO 6888-3:2003 для пищевых продуктов и животных кормов; ISO 5944:2001 для молока и молочных продуктов и  FIL-IDF 60:2001). Общая  техника посева:

Используют экстракты пищевых продуктов или 10-кратные серийные разведения. Инокулируют по 1 мл в среду одинарной концентрации. Для снижения предела выявления 10 мл исследуемого образца (для жидких продуктов) или первого разведения (для других продуктов) можно высеять в среду двойной концентрации. Для метода серийных разведений требуется не менее трех пробирок для, как минимум, трех разведений. Если нет анаэробных контейнеров, заливают слоем стерильного вазелина (Артикул 06-077) или васпара. Инкубируют в анаэробных условиях в течение 24-48 часов при температуре 37°C.

Через 24 часа все пробирки с признаками почернения среды или образования черного преципитата пересевают штрихом на чашки с агаром Байрда-Паркера (Артикул 01-030). Остальные пробирки инкубируют еще 24 часа и пересевают все пробирки с ростом (независимо от того, есть почернение или нет) на агар  Байрда-Паркера.

При определении численности бактерий НВЧ все пробирки с ростом считаются предположительно содержащими стафилококки, но только при положительном коагулазном тесте.

Образцы пищи гомогенизируют или делают серийные разведения в соответствующем буфере, вносят по 1 мл в  пробирки со средой и заливают вазелиновым маслом (Артикул 06-077). Инкубируют 24 часа при 37ºС. Для последующей идентификации производят пересев черных колоний на Основе Агара Бэрда-Паркера (Артикул 01-030). Если видовой идентификации не требуется, достаточно учесть ориентировочные результаты позитивного роста  на Бульоне Жиолитти-Кантони и провести тест на коагулазу.

Хранение

Среда предназначена только для лабораторного использования. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%)

Контроль качества

Температура инкубации:  35°C ± 2,0

Время инкубации: 24-48 часов

Инокуляция: 10-100 КОЕ (Продуктивность)/ 1.000-10.000 КОЕ (Селективность). (ISO/TS 11133-1/2)

Информация для заказа:

Артикул	Упаковка
02-230-500	500 г
02-230BA05	5х500 мл
064-TA0190	20 пробирок по 19 мл
064-TA0191	20 пробирок по 10 мл
06-089-100	раствор теллурита калия 1%, 100 мл