Агар Клиглера с железом

Агар Клиглера с железом

Kligler Iron Agar (kia)

Также известно, как Iron Agar; Kligler's Iron Agar

Назначение

Плотная  дифференциальная среда для первичной идентификации энтеробактерий, основанной на ферменции двух сахаров и продукции сероводорода, согласно стандарту ISO 6340.

Описание

Агар Клиглера – это дифференциальная среда, которая обладает всеми свойствами двухсахарного агара  по Ресселю и свинцово-ацетатной среды для выявления продукции H₂S. На этой среде можно выявить ферментацию лактоз и продукцию сероводорода, что позволяет предварительно идентифицировать большинство энтеробактерий. Ферментацию сахаров определяют по продукции кислоты, превращающей красный цвет индикатора в желтый. Так как среда содержит только небольшое количество сахара (декстрозы), продукция кислоты вследствие ее ферментации очень ограничена, а  повторное окисление индикатора происходит на поверхности, так что индикатор сохраняет красный цвет. Если происходит ферментация лактозы, большое количество  образовавшейся кислоты избегает повторного окисления, и вся среда становится желтой.

На образование сероводорода указывает почернение среды из-за реакции H₂S (выделяющегося из тиосульфата) с ионами железа, присутствующими в цитрате аммония-железа.

Приготовление

Добавить 58 г порошка на 1 л дистиллированной воды и довести до кипения. Разлить в соответствующие флаконы или пробиркии  стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС. Дайте среде застыть с образованием длинной поверхности скошенного агара и коротким столбиком среды.

Техника посева

Железный агар Клиглера используют для посева на косяки с коротким скосом и большим торцом, которые инокулируют по поверхности, а также для посева уколом. Инокулят должен быть обильным; инокулят следует брать с твердой среды, иначе результаты могут быть получены с задержкой (на 2-3 дня). Обычно инкубацию проводят в течение 18 часов при температуре 37°C.

Рекомендовано использовать пробирки с крышками, обеспечивающими вентиляцию, напр., ватными пробками, целлюлозными крышками    или крышками системы «cap-o-test».

Если используются винтовые крышки, не следует закрывать их слишком плотно, так как это может воспрепятствовать повторному окислению индикатора.

Свежеприготовленная среда Клиглера дает отличные результаты, однако если ее готовят за несколько дней до использования, для получения более точных результатов желательно ее расплавить и дать застыть повторно.

При продукции большого количества H₂S учет результатов может быть затруднен, так что настоятельно рекомендуется считывать результаты на ранних сроках. Более точные результаты можно получить  на трехсахарном железосодержащем агаре (Артикул 01 -192),  так как он содержит сахарозу, что обеспечивает более четкую дифференциацию между  представителями Proteus, Salmonella и Shigella.

Типичные реакции энтеробактерий на среде KIA

К. – кислая реакция (цвет желтый);                                  П. – образование пузырьков;

Н. – нейтральная реакция (натуральный цвет, без изменений);

+ = Продукция сероводорода (SH₂) (цвет черный);            Щ. – щелочная реакция (цвет синий).

Хранение

Среда предназначена только для лабораторного использования. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%).

Контроль качества

Температура инкубации:  35°C ± 2,0

Время инкубации: 18-24 часов

Метод посева: Укол в столбик и штриховой посев на скошенный агар.

Информация для заказа:

Артикул	Упаковка
01-103-500	500 г
01-103BA05	5х500 мл
064-TA0116	20 пробирок со скошенным агаром 7,5 мл