Агар для подсчета колоний

Агар для подсчета колоний

Plate Count Agar (PCA)

Также известно, как Trypticase Glucose Yeast Agar; TGY; TGY Agar; Standard Methods Agar, SMA; SM Agar.

Назначение

Среда для подсчета колоний анаэробных микроорганизмов, согласно стандартам ISO 4833, 8552 и 17410 и Инструкции по применению, метод 6. 

Описание

Состав агара для подсчета колоний на чашках Петри соответствует составу, предложенному Buchfinder и соавт. в их исследовании сред для подсчета микроорганизмов на чашках Петри.

Изначальный состав стандартизированного агара для молочной микробиологии был модифицирован, чтобы избежать добавления молока. Новый состав позволяет микроорганизмам расти без каких-либо дальнейших добавок.

Состав данной среды эквивалентен описанному в «Стандартных методах исследования молочных продуктов» триптонно-глюкозному агару с дрожжевым экстрактом USP, «Немецком сельском хозяйстве» и агару APHA и AOAC для подсчета колоний на чашке. Эту среду можно использовать для подсчета колоний любого образца.

Приготовление

Добавить 23,5 г порошка в 1 л дистиллированной воды. Растворить, доводя до кипения при постоянном помешивании. Разлить в соответствующие флаконы или пробиркии стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС. 

Техника посева

Готовят десятикратные серийные разведения образца, из каждого разведения отбирают 1 мл в двойной повторности и переносят в стерильные чашки Петри. В каждую чашку заливают примерно 20 мл стерильной охлажденной (примерно до 47°С) среды. Содержимое чашки перемешивают, аккуратно вращая чашку, как показано на рисунке 8. Чашки оставляют до затвердения среды и инкубируют перевернутыми. Время инкубации и температура зависят от типа исследуемого микроорганизма. Для общего аэробного подсчета чашки инкубируют в течение 3 дней при 30°С. Показания снимают спустя 24, 48 и 72 часа. Метод подсчета колоний на чашках Петри, предложенный Американской Ассоциацией Здравоохранения, заключается в заливке расплавленного агара при 50°С на чашки, содержащие разведенные образцы (метод заливки чашек). Окончательный подсчет проводится спустя 48 часов после инкубации при 32-35°С.

Для микроорганизмов с другими температурными потребностями предлагаются следующие режимы инкубации: 2 дня при 32-35°С, 2-3 дня при 45°С, 2 дня при 55°С, 3-5 дней при 20°С, 7-10 дней при 5-7°С.

Разведения образцов готовятся с использованием ¼ раствора Рингера (Артикул 06-073), забуференной пептонной воды (Артикул 02-277) или растворителя для максимального выделения микробов (Артикул 02-510) в зависимости от их природы.

Метод заливки чашек для подсчета колоний более предпочтителен, чем метод посева шпателем, поскольку он позволяет получить большее количество колоний. Тем не менее, последний обеспечивает изоляцию и возможность пересева колоний.

Хранение

Среда предназначена только для лабораторного использования. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%)

Контроль качества

Температура инкубации:  35°C ± 2,0

Время инкубации: 24-48 часов

Инокуляция: 10-100 КОЕ. Метод посева: спиральный (согласно стандарту ISO/TS 11133-1/2)

Артикул	Упаковка
01-161-500	500 г
01-161BA05	5х500 мл
064-PA0024	20 чашек Ø90 мм
064PA0024I	20 чашек Ø90 мм, стерилизованы радиацией, в двойной упаковке
064-PA0144	20 чашек Ø90 мм, с ТТС, в тройной упаковке
064-PF0007	30 чашек Ø55 мм
064-PR0001	30 контактных чашек, стерилизованы радиацией
064-PR0020	30 контактных чашек, TLHTh,стерилизованы радиацией, в двойной упаковке
064-PR0041	24 контактных чашек в тройной упаковке
064-PR0039	24 контактных чашек, TLHTh, в тройной упаоквке
064-BA3038	10 флаконов по 200 мл
064-BA1005	10 флаконов по 100 мл
064-TA0325	20 пробирок по 15 мл
064PRB0043	80 контактных чашек,стерилизованы радиацией, в тройной упаковке
064PRB0044	80 контактных чашек, TLHTh, стерилизованы радиацией, в тройной упаковке
064 PR0044	80 контактных чашек, TLHTh, стерилизованы радиацией, в тройной упаковке