Агар CCA

Агар CCA 

Chromogenic Colinstant Agar

Назначение

Плотная селективная и дифференциальная среда для детекции и подтверждения E. coli в воде и пищевых образцах.

Описание

Селективность хромогенного агара Колинстант обусловлена сурфактантным действием желчных кислот No. 3, подавляющим рост почти всех грамположительных бактерий. Другие ингибиторы добавляют, если желательно добиться еще более высокой селективности.

Хромогенная смесь в основном состоит из двух субстанций: 6-хлоро-3-индоксил-p-D-галакто-пиранозида и 5-бромо-4-хлоро-3-индоксил-p-D-глюкуронида. Первая расщепляется характерным для колиформ ферментом p-D-галактозидазой и придает колониям колиформ лососево-красное окрашивание.

Вторая хромогенная субстанция расщепляется p-D-глюкуронидазой, специфичной для E. сoli, и придает колониям кишечной палочки синий цвет.

E. coli экспрессирует оба фермента и расщепляет обе хромогенные субстанции, что приводит к образованию колоний, окрашенных в темно-синий или фиолетовый цвет. Сумма колоний E. coli плюс колонии лососево-красного цвета составляет общее количество колиформных бактерий. Другие грамотрицательные бактерии образуют бесцветные колонии, за исключением некоторых, обладающих глюкуронидазной активностью (но не галактозидазной), которые образуют светло-синие  и бирюзовые колонии.

Чтобы убедиться в том, что колонии образованы E. сoli, добавляют небольшое количество триптофана, выявляющего продукцию индола: на сине-фиолетовые колонии наносят каплю  реактива Ковакса (Артикул RE0007). Появление в течение нескольких секунд вишнево-красного окрашивания подтверждает образование индола и, следовательно, присутствие E. coli.

Если хромогенный агар Колинстант используют для метода мембранной фильтрации, цвет и рост колоний могут меняться в зависимости от характеристик мембранного фильтра. Желательно проводить валидацию используемого типа мембранных фильтров.

Приготовление

Развести 37,8  г порошка в 1 л дистиллированной воды.  Вскипятить и разлить в соответствующие флаконы или пробирки. Стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС. Если среда будет использована в течение нескольких дней, ее можно не стерилизовать, но подвергнуть кипячению как минимум в течении 2-3 минут.

Примечание: Данная среда обладает низкой селективностью. При высокой численности микробиоты, особенно если в образце предполагается присутствие Pseudomonas и Aeromonas, селективность среды может быть улучшена за счет добавления одного флакона селективной добавки Coliform CV (Артикул 06-140-LYO) к 500 мл среды, охлажденной до 45-50°C.

Необходимые добавки

Селективная добавка ColiformCV (Артикул 06-140-LYO)

Флакон содержит:

Необходимое количество на 500 мл среды.

Хранение

Среда предназначена только для использования в лабораториях. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°C и влажности <60%).

Контроль качества

Температура инкубации: 35°C ± 2,0

Время инкубации: 24 часа

Инокуляция: 10-100 КОЕ (Продуктивность)/ 1.000-10.000 КОЕ (Селективность). Метод посева: спиральный (или метод мембранных фильтров)

Escherichia coli ATCC 25922          Escherichia coli ATCC 11775       Salmonella typhimurium ATCC 14028

Информация для заказа:

Артикул	Упаковка
01-618-500	500 г
01-618BA05	5х500 мл
064-PA6015	20 чашек Ø90 мм
06-140LYO1	селективная добавка Coliform CV, 10 флаконов