Ацетатный агар дифференциальный

Ацетатный агар дифференциальный

Acetate Differential Agar

Назначение

Плотная среда, применяемая для дифференциации различных Shigella образцов E. coli, согласно стандарту ISO 21567:2004.

Формула (в г/л)

Натрия хлорид, Натрия ацетат, Моно-аммония фосфат, Би-калия фосфат, Магния сульфат, Бромтимоловый синий, Агар. 

Окончательное значение pH 6,7  ± 0,2 при 25°С.

Приготовление

Развести 24,3 г порошка в 1 л дистиллированной воды и вскипятить. Разлить в подходящие по объему пробирки и стерилизовать автоклавированием 15 минут при температуре 121ºС. Дайте среде застыть в скошенной позиции, 5 см. 

Описание

Ацетатный агар дифференциальный – это твердая питательная среда известного химического состава, содержащая смесь минеральных солей с источником неорганического азота и ацетатом натрия как единственным источником углерода.

Среды с органическими кислотами в качестве источника углерода и без органического азота часто применяют для дифференциации энтеробактерий. Фактически, ацетатный агар соответствует по составу модифицированному цитратному агару Симмонса (Артикул 01-177) (Trabuisi & Ewing, 1962), но цитрат заменен на ацетат. Шигеллы не способны утилизировать ацетат и расти на этой среде. Другие бактерии, особенно E. coli, вырастают за 24-48 часов, и ацетат превращается в щелочные метаболиты, в присутствии которых индикатор pH меняет цвет с зеленого на синий.

Техника посева

Чистую культуру наносят штрихом на поверхность скошенного агара. Количество переносимой с инокулятом культуральной среды должно быть минимальным. Инкубируют 48  часов при температуре 37 ± 1°C в аэробных условиях. По окончании периода инкубации осматривают на предмет микробного роста: при наличии роста зеленый цвет питательной среды превращается в синий. При отсутствии роста инкубируют еще 48 часов и повторно оценивают рост.

Шигеллы на этой среде не растут, и питательная среда не видоизменяется. E. coli образуют колонии синего цвета, среда также становится синей. Другие виды бактерий могут расти на ацетатном агаре, но для окончательной идентификации требуется дополнительное тестирование.

Недостатки среды:

-Некоторые биотипы Shigella flexneri могут использовать ацетат как единственный источник углерода.

-Некоторые шт. E. coli утилизируют ацетат медленно и могут давать ложноотрицательный результат.

Другие бактерии, не относящиеся к роду Shigella или Escherichia, могут утилизировать ацетат как единственный источник углерода.

Хранение

Среда предназначена только для лабораторного использования. Храните среду в банке с плотно закрытой крышкой, в темном, сухом, прохладном месте (при температуре от +4°C до 30°Cи влажности <60%).

Контроль качества

Температура инкубации:  35°C ± 2,0

Время инкубации: 24 часа– 5 дней

Инокуляция: посев штрихом

Информация для заказа: